基于网络药理学与分子对接探讨木瓜治疗膝骨关节炎的分子机制

目的:基于网络药理学探索木瓜治疗膝骨性关节炎的分子作用机制。方法:基于口服生物利用度(OB)及药物相似性(DL),通过中药系统药理学数据库(TCMSP)筛选木瓜的主要活性成分。运用GeneCards、OMIM数据库建立膝骨性关节炎靶标数据库。通过Cytoscape 3.7.1软件构建"活性成分-作用靶标-疾病"可视化交互网络;运用STRING数据库构建蛋白互作网络,分析相关蛋白互作关系;对核心靶点进行京都基因与基因百科全书(KEGG)通路及基因本体(GO)生物过程富集分析。通过Discovery Studio软件对药物活性成分与疾病靶点进行分子对接验证。结果:筛选得到木瓜活性成分3个,涉及44个作用靶点。网络分析结果表明,靶点主要涉及调节细胞代谢、凋亡等生物学过程,通过调节细胞凋亡、肿瘤坏死因子(TNF)、p53、核转录因子-κB(NF-κB)、糖基化终末产物(AGE)及其受体(RAGE)等信号通路来发挥治疗膝骨关节炎的作用。分子对接结果表明,木瓜活性成分与膝骨性关节炎的血管内皮生长因子A(VEGFA)、白细胞介素-6(IL-6)、雌激素受体1(ESR1)等靶点对接吻合度较好。结论:木瓜治疗膝骨性关节炎具有多系统、多成分、多靶点的特点;其可能的作用机制包括控制炎症,调控关节软骨代谢、生长和修复,促进细胞增殖、分化,抑制细胞凋亡和抵抗氧化应激等以达到控制疾病发生发展的目的;木瓜中槲皮素、白桦脂酸、表儿茶酸等活性成分可能是其治疗膝骨性关节炎的物质基础。     

凉血解毒化瘀汤治疗乙肝相关性慢加急性肝衰竭临床研究

目的:观察凉血解毒化瘀汤对乙肝相关性慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)患者肝功能、凝血指标的影响。方法:选取98例HBV-ACLF患者,按随机数字表法分为对照组和观察组各49例。对照组采用常规西药治疗,观察组在对照组的基础上联合凉血解毒化瘀汤治疗。比较2组治疗前后肝功能、凝血指标、并发症以及临床疗效。结果:观察组总有效率为89.80%,高于对照组71.43%(P0.05)。治疗后,2组谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、血清总胆红素(TBil)和凝血酶原时间(PT)水平较治疗前降低,白蛋白(Alb)和凝血酶原活动度(PTA)较治疗前升高(P0.05);观察组ALT、AST、TBil和PT水平低于对照组,Alb和PTA水平高于对照组(P0.05)。治疗后,2组中医证候评分较治疗前降低(P0.05),且观察组中医证候评分低于对照组(P0.05)。观察组并发症发生率为6.12%,低于对照组28.57%(P0.05)。结论:凉血解毒化瘀汤治疗HBV-ACLF患者,能够改善肝功能和凝血功能,降低并发症发生率,疗效肯定。     

腺病毒介导的Hes1基因抑制肝细胞癌细胞的增殖与迁移CSCD

目的探讨Hes1基因对肝细胞癌细胞系Hep1-6细胞增殖、迁移与侵袭的影响。方法通过重组腺病毒载体介导Hes1基因在Hep1-6细胞系中过表达,随后测定细胞克隆形成率、增殖速率及体外迁移与侵袭能力的改变。结果Hep1-6细胞分别感染Ad-Hes1和阴性对照Ad-GFP后,感染Ad-Hes1的细胞系克隆形成数显著少于对照组(P<0.001);感染病毒6天后,CCK-8检测感染Ad-Hes1的细胞系在OD450 nm的吸光度值显著低于对照组(P<0.01);感染Ad-Hes1的细胞系24 h和48 h的划痕愈合率显著低于对照组(P<0.001);感染Ad-Hes1的细胞系在Transwell小室培养48 h后迁移进入Transwell下室的细胞数量显著低于对照组(P<0.001);感染Ad-Hes1的细胞系在铺有Matrigel基质胶的Transwell小室培养48 h后侵袭进入Transwell下室的细胞数量显著低于对照组(P<0.01)。结论Hes1有抑制Hep1-6细胞增殖、迁移与侵袭的作用。     

MiRNA let-7a对人喉鳞癌细胞增殖的抑制作用CSCD

目的探讨miRNA let-7a调控高迁移率族蛋白2(HMGA2)对人喉鳞癌细胞株TU212增殖的影响。方法合成let-7a模拟体(let-7a mimics)并采用阳离子脂质体法瞬时转染入喉癌TU212细胞,裸鼠皮下注射TU212细胞,构建裸鼠移植瘤模型。RT-qPCR和Western blot法分别检测转染后TU212细胞及移植瘤内let-7a和HMGA2的表达。结果在过表达let-7a的喉癌TU212细胞中,HMGA2的转录和翻译水平下调,细胞增殖能力降低。体外成瘤实验证实,与let-7a NC组和空白对照组相比,转染let-7a mimics的喉癌细胞TU212成瘤组织的质量和体积均显著下降;let-7a过表达的TU212成瘤组织中HMGA2的mRNA和蛋白水平均明显下调。结论let-7a能显著抑制HMGA2的mRNA和蛋白表达,进而显著抑制喉癌细胞的增殖。     

江苏省13家医院新生儿严重高胆红素血症现状调查

目的 了解江苏省新生儿严重高胆红素血症的发生情况及诊治、随访等管理情况，为新生儿严重高胆红素血症的预防及规范化管理提供依据。方法 以2018年1~12月江苏省13家医院收治的严重高胆红素血症新生儿为研究对象，回顾性分析患儿的临床资料及随访资料。结果 江苏省13家医院2018年严重高胆红素血症新生儿病例共上报740例，占新生儿科收治病例总数的2.70%（740/27 386），其中重度高胆红素血症620例（83.8%），极重度高胆红素血症106例（14.3%），危险性高胆红血症14例（1.9%）；诊断为急性胆红素脑病共4例（0.5%）。484例（65.4%）新生儿于分娩机构出院后因严重高胆红素血症返回医院住院治疗，中位入院日龄为7 d，其中214例（44.2%）再入院前进行过门诊黄疸随访，第1次门诊中位随访日龄为6 d。住院期间行头颅MRI检查211例（28.5%），其中85例（40.3%）提示双侧基底节、苍白球T1WI信号偏高；行脑干听觉诱发电位检查238例（32.2%），其中14例（5.9%）仅一侧通过，7例（2.9%）双侧均未通过。急性胆红素脑病或危险性高胆红素血症患儿（共17例）进行了随访，除1例失访外，均无异常神经系统症状。结论 新生儿严重高胆红素血症在新生儿科住院病人中的占比较高；新生儿从分娩机构出院后黄疸监测及管理需要加强；对并发了严重高胆红素血症的患儿，住院期间相关检查需更完善，出院后均需全面系统地随访。     

表面等离子共振技术在中医药研究中应用进展

利用表面等离子共振现象制备的生物传感技术具有无标记、灵敏度高、通量大、特异性强，样品耗损少等优点，在生命科学等众多学科中得到了广泛的关注和应用。近年来该技术也被运用在不少中医药研究的重要领域。本文简要介绍了表面等离子共振原理，总结并评述了在中医药新靶标发现、优效小分子寻找等方向的研究进展和前景。     

基于胶质淋巴系统探讨“毒损脑络”

络脉是经脉系统的分支,具有沟通表里上下、联系脏腑的作用,在支持气血运行方面呈现双向流动的特性,具有物质交换和新陈代谢的功能。脑为诸阳之会,脑络纵横交错,脑络渗灌气血以充实脑髓并敷布阳气以温煦脑神,为"脑主神明"提供物质基础和源动力。病理情况下脑络不通,毒邪内生,而致"毒损脑络"。"毒损脑络"病机学说不仅应用于中风病机研究中,而且拓展到痴呆等其他脑病中,推动了中医脑病病机理论的发展。新近发现脑内存在"胶质淋巴系统",是星形胶质细胞介导的脑脊液-脑间质液的交换流动系统。胶质淋巴系统把脑脊液中的葡萄糖、脂质、电解质和载脂蛋白E等营养物质和神经活性物质运送到脑组织,也能清除脑内代谢产物(如乳酸)、可溶性蛋白(如β-淀粉样蛋白和Tau蛋白)和异物,这是维持脑内环境稳态的重要液体流动系统。胶质淋巴系统的发现为神经系统疾病病理机制的研究提供了新视角,可能成为脑血管疾病、神经退行性疾病等神经精神系统疾病干预的新靶点。作为脑内广泛分布的代谢废物排出途径和物质运送系统的胶质淋巴系统可能是"脑络"病变的生物学基础,是中西医对"毒损脑络"认识的交叉点,从胶质淋巴系统探析"毒损脑络",有可能为揭示"毒损脑络"的现代内涵提供新的靶点。     

丹蛭降糖胶囊通过mTOR/S6K1信号通路对糖尿病肾病大鼠的干预作用研究

目的研究丹蛭降糖胶囊对糖尿病肾病大鼠的肾脏病理改变和足细胞自噬水平的影响,初步探讨其相应的作用机制。方法选取GK大鼠40只,采用醋酸脱氧皮质酮-盐皮下注射联合高脂饲料喂养诱导糖尿病肾病模型。造模成功后随机分为模型组、丹蛭降糖胶囊低剂量组[0.54 g/(kg·d)]、高剂量组[1.08 g/(kg·d)]、缬沙坦组[10 mg/(kg·d)],每组10只。另选取10只同周龄正常Wistar大鼠作为正常组。模型组和正常组给予等容积生理盐水。连续灌胃10周后检测空腹血糖(FBG)、血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)和尿微量蛋白(U-mAlb)。Western Blot检测肾小球p-mTOR、p-S6K1、Beclin-1、LC3和Nephrin蛋白的表达,HE染色和PAS染色后于光镜下观察肾脏病理变化,电镜下观察各组亚细胞形态结构变化。结果与正常组比较,模型组FBG、SCr、BUN、U-mAlb水平升高(P<0.01);与模型组比较,丹蛭降糖胶囊低、高剂量组和缬沙坦组U-mAlb水平降低(P<0.01)。模型组可见肾小球基底膜增厚,系膜基质沉积,足细胞损伤,各用药组均有不同程度改善,丹蛭降糖胶囊高剂量组足细胞内有较多自噬体形成。与正常组比较,模型组p-mTOR、p-S6K1的表达增高,Nephrin、Beclin-1和LC3的表达水平降低(P<0.01);与模型组比较,各用药组p-mTOR、p-S6K1的表达下降,Nephrin、Beclin-1和LC3的表达增高(P<0.01)。丹蛭降糖胶囊高剂量组和缬沙坦组Beclin1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ水平较丹蛭降糖胶囊低剂量组升高(P<0.05)。结论丹蛭降糖胶囊具有减轻糖尿病肾病大鼠U-mAIb、足细胞损伤及相关肾脏病理改变的作用,其机制可能与抑制mTOR/S6K1信号通路进而提高足细胞的自噬活性有关。     

平之胶囊联合西医常规疗法治疗急性缺血性中风病风痰瘀阻证临床研究

目的观察平之胶囊联合西医常规疗法治疗急性缺血性中风病风痰瘀阻证临床疗效。方法采用随机数字表法将200例缺血性中风病风痰瘀阻证患者分为治疗组和对照组各100例。2组均予西医常规疗法,治疗组并予平之胶囊,每日3粒,每日3次,口服。2组均连续治疗2个月。观察2组临床疗效,比较2组治疗前后中医症状积分、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、日常生活能力量表(ADL)评分,血脂、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、同型半胱氨酸(Hcy)、血液流变学指标,观察2组不良反应。结果治疗组、对照组分别脱落1、2例。治疗组总有效率为88.9%(88/99),对照组为69.4%(68/98),2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。与本组治疗前比较,2组治疗后中医症状积分、NIHSS评分明显下降,ADL评分明显升高(P<0.05);2组治疗后比较,治疗组上述评分明显优于对照组(P<0.05)。与本组治疗前比较,治疗组总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平明显降低(P<0.05),对照组TC水平明显降低(P<0.05);2组治疗后比较,治疗组TC、LDL-C水平明显低于对照组(P<0.05)。与本组治疗前比较,2组治疗后MMP-9、hs-CRP、Hcy水平明显降低(P<0.05);2组治疗后比较,治疗组MMP-9、hs-CRP、Hcy水平明显低于对照组(P<0.05,P<0.01)。与本组治疗前比较,治疗组血浆黏度、纤维蛋白原(FIB)、全血黏度(高切、低切)、红细胞聚集指数明显下降(P<0.05,P<0.01),对照组FIB、红细胞聚集指数明显下降(P<0.05);2组治疗后比较,治疗组FIB、全血黏度低切、红细胞聚集指数明显低于对照组(P<0.05)。2组均未见明显不良反应。结论平之胶囊联合西医常规疗法治疗急性缺血性中风病风痰瘀阻证疗效显著,可改善患者中医症状,降低血脂,保护血管内皮细胞,延缓病情进展。